A terem a pápák magánkápolnája, itt tartják a konklávékat, a bíborosok pápaválasztó tanácskozásait. II. Gyula pápa 1512. október 31-én vecsernye keretében avatta fel a kápolnát, amelynek mennyezetfreskóján négy éven át dolgozott a mester. A félévezredes évforduló alkalmából XVI. Benedek pápa is vecsernyét tart szerda este a Sixtus-kápolnában.

Az 540 négyzetméteres alkotás a világ legnagyobb egybefüggő freskója. Michelangelo a kilenc központi festményen Mózes első könyvének jeleneteit örökítette meg, köztük található a freskó legismertebb részlete, Ádám teremtése. A Sixtus-kápolna ma a világ leglátogatottabb helyisége. A kápolnát évente ötmilliónyian látogatják, a nyári turisztikai szezonban naponta húszezren keresik fel. 

Nagy vihart kavart a minap Pietro Citati olasz irodalomkritikus, aki az évforduló kapcsán az egyik nagy olasz napilapban közölt nyílt levelében élesen bírálta a turistákat, mert "részeg hordaként" viselkednek a szent helyen. Szerinte a látogatók veszélyt jelentenek a műalkotásra, amelyet károsíthat a kilélegzett szén-dioxid és pára, a lábbelikkel behurcolt por, a nagy tömeg miatt megemelkedő hőmérséklet. Pietro Citati csak a legújabb a kritikusok sorában, akik azt követelik, hogy a Vatikán erőteljesen csökkentse a látogatók számát.

Antonio Paolucci igazgató azonban kedden kijelentette: sem a közeljövőben, sem középtávon nem csökkentik a látogatók számát, bár előfordulhat, hogy hosszú távon limitálni kényszerülnek a belépést. 

1994-ben 14 évig tartó rekonstrukció eredményeként a kápolnát korszerű légkondicionáló, páramentesítő és porszűrő rendszerrel látták el, az elmúlt 18 évben azonban tovább nőtt a látogatottság, ami rendkívüli módon leterhelte a berendezéseket. A múzeumigazgató szerint egy "radikálisan innovatív" projektet dolgoztak ki a freskókat károsító tényezők kiiktatására, és a rendszer körülbelül egy éven belül kész lesz.